加入時(shí)間：2011-12-14 09:01:49 當(dāng)前新聞點(diǎn)擊率：5071
血細(xì)胞分析儀發(fā)展中的技術(shù)進(jìn)步
隨著各種技術(shù)的不斷進(jìn)步以及實(shí)驗(yàn)室工作對儀器設(shè)備需求的不斷增加， 血液細(xì)胞分析儀的各項(xiàng)用途和用法也有不斷的進(jìn)展，這首先體現(xiàn)在儀器應(yīng)用的方便性、準(zhǔn)確性和盡可能增加的參數(shù)上。
1、稀釋技術(shù)的進(jìn)步： 早期的儀器一般要求在測定前先進(jìn)行人工稀釋，因此許多操作要求直接取20～40ul 的末梢血加到稀釋液中。白細(xì)胞稀釋比例多在1：251 和1： 501倍，紅細(xì)胞則需要進(jìn)行二次稀釋， 稀釋倍數(shù)在6.25～25萬倍之間， 然后再將稀釋好的標(biāo)本放入計(jì)數(shù)杯內(nèi)進(jìn)行計(jì)數(shù)，而且需要在白細(xì)胞稀釋懸液中加入溶血?jiǎng)?。由于人工稀釋費(fèi)時(shí)費(fèi)力且精確性差，隨后的一些血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀增加配置了專用的稀釋器， 專供該型號的儀器進(jìn)行機(jī)外稀釋，這樣減少了人工稀釋帶來的誤差和麻煩，提高了效率。這類儀器的典型例子有國內(nèi)應(yīng)用非常普遍，目前仍有市場需求并在廣泛使用?，F(xiàn)代的血球儀則更加先進(jìn)，已經(jīng)將自動(dòng)稀釋技術(shù)，自動(dòng)進(jìn)樣方式全部添加到儀器本體內(nèi)，即提高了技術(shù)含量、取樣和稀釋的精確度，使得進(jìn)樣的速度和可操作性更加方便，同時(shí)使得檢測速度加快。
2、分析參數(shù)的增加：前面談到早期的血球計(jì)數(shù)儀僅能進(jìn)行紅白細(xì)胞計(jì)數(shù)， 而且是需要通過切換分別進(jìn)行紅白細(xì)胞得計(jì)數(shù)， 所以將其稱為血細(xì)胞計(jì)數(shù)器是恰當(dāng)?shù)谩Ｓ捎谘Ｒ?guī)檢驗(yàn)對血紅蛋白測定的需求增加，沙利比色法由于精度和操作不便不能滿足臨床需求，已經(jīng)有單獨(dú)的血紅蛋白比色計(jì)配備，將加入專用的溶血?jiǎng)┖蟮臉颖具M(jìn)行白細(xì)胞計(jì)數(shù)后再將其倒入血紅蛋白比色計(jì)， 即可得到比色法測定的血紅蛋白結(jié)果。此時(shí)期國內(nèi)使用最多的血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀是Coulter ZF 型和血紅蛋白計(jì)。由于對血紅蛋白測定要求的增加，因此在儀器內(nèi)增加一套比色裝置，就可方便的測定血紅蛋白。電阻法定細(xì)胞數(shù)量的同時(shí)還可對細(xì)胞體積進(jìn)行測定，因此對紅細(xì)胞平均體積（MCV）、紅細(xì)胞壓積（HCT）、平均紅細(xì)胞血紅蛋白量（MCH）、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度（MCHC）測定和計(jì)算也成為血球計(jì)數(shù)儀的標(biāo)準(zhǔn)參數(shù)。1975 年日本東亞公司（TOA， Sysmex 的前身） 推出了包含以上7 個(gè)參數(shù)的全自動(dòng)血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀器CC－710 和CC －720 型。
3、血小板計(jì)數(shù)功能的增加：血小板是血細(xì)胞中最小的粒子，早期的血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀均不包含血小板計(jì)數(shù)。60 年代起國外開始研制血小板計(jì)數(shù)儀，70 年已經(jīng)有比較成熟的產(chǎn)品，這類儀器一般需使用PRP 血漿進(jìn)行， 即使用特殊的離心速度將紅細(xì)胞和白細(xì)胞進(jìn)行沉淀，使上層血漿中盡量保存最為豐富的血小板，然后應(yīng)用這種PRP 血漿進(jìn)行血小板計(jì)數(shù)，例如Sysmex PA-701 型和CONTRAVE 1000 型，此類儀器多配有專用PRP 離心機(jī)（圖6 為TOA PLT-100 型血小板計(jì)數(shù)儀和離心機(jī)）。使用全血方式和水動(dòng)力聚集方式計(jì)數(shù)血小板的儀器如Clay-Adams 的Ultra-Flo100 型以及80 年代后出現(xiàn)在我國的Baker S-810 型血小板分析儀（圖7 為作者15 年前應(yīng)用Baker S-810 型血小板分析儀的工作照片），該儀器設(shè)定了單獨(dú)血小板分析測量通道，根據(jù)紅細(xì)胞和血小板體積的顯著差異他們區(qū)分開（圖8），將血小板按體積大小劃分到64 個(gè)通道，分別累加體積大小不同的血小板數(shù)量。它通過直接吸入稀釋好的血細(xì)胞懸液進(jìn)行測定，除了給出血小板數(shù)量外，還提供了兩個(gè)新的參數(shù)，平均血小板體積(MPV) 和血小板體積分布寬度（PDW）。在這之后血細(xì)胞分析儀將血小板計(jì)數(shù)這一重要功能合并到全血細(xì)胞計(jì)數(shù)（CBC） 范圍內(nèi)。當(dāng)時(shí)的儀器有很多型號，例如Baker 8000, Sysmex CC-800,Coulter S 系列和T 系列等。
3、定量部的改進(jìn)：儀器為了準(zhǔn)確進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，除了要準(zhǔn)確稀釋血液外， 對直接進(jìn)入計(jì)數(shù)小孔內(nèi)的液體量也要進(jìn)行定量控制，因此儀器對定量部的要求是非常嚴(yán)格的。在血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀開始階段， 人們設(shè)計(jì)了U型水銀管壓力計(jì)，通過水銀的重量和在兩個(gè)電極間的距離來控制吸入的標(biāo)本量。后來人們通過兩只光電管來了解液體通過一個(gè)固定距離所需要的時(shí)間和容積來控制標(biāo)本的吸入量，還有一些公司設(shè)計(jì)并使用了微量注射器技術(shù)以及浮球定量技術(shù)來控制計(jì)數(shù)樣本的量。最新的光電計(jì)時(shí)容量控制技術(shù)控制標(biāo)本進(jìn)入計(jì)數(shù)區(qū)的量，可以使得進(jìn)入計(jì)數(shù)區(qū)域的細(xì)胞懸液定量更加準(zhǔn)確和無污染、同時(shí)還可判斷小孔是否出現(xiàn)堵塞或半堵塞問題，以及便于維護(hù)。
4、自動(dòng)取樣技術(shù)： 由于儀器需要對全血進(jìn)行自動(dòng)取樣和稀釋， 因此取樣量也同樣需要精確控制。最初的儀器是需要進(jìn)行手工取樣和稀釋的，后來逐漸有了外置式專用取樣稀釋器。再后來儀器內(nèi)部設(shè)置了內(nèi)置式負(fù)壓取樣稀釋器，根據(jù)負(fù)壓量的大小來吸取血液樣品，這對控制負(fù)壓的精確度要求很高，此外還有微量注射器取樣技術(shù)，依靠光電管控制血液取樣量的技術(shù)等。目前認(rèn)為采用旋轉(zhuǎn)閥取樣技術(shù)是比較精確的方法，旋轉(zhuǎn)伐內(nèi)部有多個(gè)按一定體積設(shè)計(jì)的小孔，當(dāng)血液進(jìn)而后，旋轉(zhuǎn)伐從吸入的小孔轉(zhuǎn)向排出的小孔，此時(shí)血液不能再進(jìn)入，而孔內(nèi)保留的固定量的血液進(jìn)入儀器的稀釋部，然后清洗，再進(jìn)入下一次循環(huán)。目前許多更加先進(jìn)的血液分析儀均采用陶瓷制的旋轉(zhuǎn)閥來分配血液標(biāo)本。
進(jìn)樣方式也從最初的單一預(yù)稀釋方式，演化為預(yù)稀釋和全血方式兩者兼有?，F(xiàn)在許多先進(jìn)的五分類血液分析儀還采用了更多種進(jìn)樣方式，如末梢血方式、開蓋手工進(jìn)樣、閉蓋手工進(jìn)樣、急診檢驗(yàn)進(jìn)樣、全自動(dòng)進(jìn)樣等方式以及連接到全自動(dòng)流水線的自動(dòng)進(jìn)樣技術(shù)等。進(jìn)樣設(shè)備有的采用旋轉(zhuǎn)式進(jìn)樣盤，這種旋轉(zhuǎn)式進(jìn)樣器多是選配件。更多的血液細(xì)胞分析儀采用了平推式的自動(dòng)進(jìn)樣系統(tǒng)，即將待檢樣品插在專用試管架上，儀器將試管架一步步送入儀器的取樣口，測定完畢后自動(dòng)推出。平推式自動(dòng)進(jìn)樣系統(tǒng)在有些廠家的儀器上是可選擇的配件，而在某些儀器上則是必備件。
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