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    DNA測序是一項(xiàng)廣泛應(yīng)用于高端體檢、產(chǎn)前診斷等領(lǐng)域的技術(shù)，影星安吉麗娜·朱莉、蘋果公司創(chuàng)始人史蒂夫·喬布斯都曾接受過DNA測序，而前不久兩部委卻叫停基因測序相關(guān)技術(shù)及產(chǎn)品，這一舉措引發(fā)了廣泛的社會關(guān)注。但是還是有很多人對DNA測序原理和方法都不太明白，為此我們請南京普東興技術(shù)顧問陸主任為大家答疑解惑。

    DNA測序方法有很多種，如Sanger雙脫氧鏈終止法、化學(xué)降解法、自動化測序法等等。

    Sanger雙脫氧鏈終止法原理：測序過程需要先做一個聚合酶連鎖反應(yīng)（PCR）。PCR過程中，雙脫氧核糖核苷酸可能隨機(jī)的被加入到正在合成中的DNA片段里。由于雙脫氧核糖核苷酸多脫了一個氧原子，一旦它被加入到DNA鏈上，這個DNA鏈就不能繼續(xù)增加長度。最終的結(jié)果是獲得所有可能獲得的、不同長度的DNA片段。目前最普遍最先進(jìn)的方法，是將雙脫氧核糖核苷酸進(jìn)行不同熒光標(biāo)記。將PCR反應(yīng)獲得的總DNA通過毛細(xì)管電泳分離，跑到最末端的DNA就可以在激光的作用下發(fā)出熒光。由于ddATP，ddGTP，ddCTP，ddTTP熒光標(biāo)記不同，計算機(jī)可以自動根據(jù)顏色判斷該位置上堿基究竟是A，T，G，C中的哪一個。

    化學(xué)修飾法測序原理：將一個DNA片段的5'端磷酸基作放射性標(biāo)記，再分別采用不同的化學(xué)方法修飾和裂解特定堿基，從而產(chǎn)生一系列長度不一而5'端被標(biāo)記的DNA片段，這些以特定堿基結(jié)尾的片段群通過凝膠電泳分離，再經(jīng)放射線自顯影，確定各片段末端堿基，從而得出目的DNA的堿基序列。

    自動化測序法原理：與鏈終止法測序原理相同，只是用不同的熒光色彩標(biāo)記ddNTP，如ddATP標(biāo)記紅色熒光，ddCTP標(biāo)記藍(lán)色熒光，ddGTP標(biāo)記黃色熒光，ddTTP標(biāo)記綠色熒光.由于每種ddNTP帶有各自特定的熒光顏色，而簡化為由1個泳道同時判讀4種堿基.