免费人成网站在线观看不卡,久久66热人妻偷产精品,免费观看18禁黄网站,麻豆蜜桃av蜜臀av色欲av,免费观看18禁无遮挡真人网站

    普朗醫(yī)療器械公司科技——結(jié)核病的細(xì)菌學(xué)檢查目前是結(jié)核病實(shí)驗(yàn)室診斷的金標(biāo)準(zhǔn)。通過(guò)血液細(xì)胞分析儀研究，由于痰涂片陽(yáng)性率較低，鏡檢需要經(jīng)驗(yàn)，難以區(qū)分環(huán)境分枝桿菌造成的假陽(yáng)性；痰培養(yǎng)需時(shí)太長(zhǎng)，因此細(xì)菌學(xué)檢查對(duì)結(jié)核病的診斷價(jià)值有限。隨著分子生物學(xué)技術(shù)的迅速發(fā)展，用高度敏感的方法檢測(cè)結(jié)核菌及其特異性DNA片段，如PCR、生物探針和基因芯片等，需要相應(yīng)的檢測(cè)設(shè)備和檢測(cè)費(fèi)用高未能廣泛推廣。血清學(xué)診斷技術(shù)有其固有的優(yōu)勢(shì)，如操作簡(jiǎn)便、快速、便于推廣、無(wú)需特殊精密血液分析儀器，已有多種純化的特異性抗原可采用，可以發(fā)展成自動(dòng)化檢測(cè)，尤其是對(duì)痰培養(yǎng)陰性和肺外結(jié)核病有較為重要的輔助診斷價(jià)值，受到廣泛的重視。本文從靶抗原的選擇和檢測(cè)技術(shù)的改進(jìn)等方面綜述了結(jié)核病血清學(xué)診斷的現(xiàn)狀和進(jìn)展。

    血清學(xué)診斷技術(shù)的發(fā)展

    在結(jié)核病血清學(xué)診斷過(guò)程中發(fā)現(xiàn)單一抗原無(wú)法產(chǎn)生令人滿意的診斷結(jié)果，多克隆抗原“雞尾酒”的應(yīng)用，有助于血清學(xué)診斷特異性和敏感性的提高。 ELISA方法簡(jiǎn)便易行，快速又無(wú)需特殊精密儀器，在結(jié)核病血清學(xué)診斷方面研究最多，應(yīng)用最廣并在技術(shù)上進(jìn)行了多方面的改進(jìn)。另外，免疫印跡技術(shù)、蛋白芯片技術(shù)等檢測(cè)血清抗體方法，為結(jié)核病的診斷提供了有價(jià)值的手段。

    1.聯(lián)合應(yīng)用結(jié)核抗原 將結(jié)核特異性的抗原聯(lián)合或者幾種特異蛋白融合成多聚蛋白復(fù)合物用于檢測(cè)能提高診斷能力，不影響診斷特異性，而比單一抗原法具有更高的敏感性。Okuda等回顧性地分析了三種結(jié)核病血清學(xué)診斷抗原TBGL、LAM、A60在活動(dòng)性肺結(jié)核中的應(yīng)用，其敏感性分別為70.1%、67.5%、70.9%，特異性分別為92.5%、97.5%、95.0%。三種抗原聯(lián)合檢測(cè)其敏感性提高到91.5%，特異性降為87.5%。Houghton等報(bào)道用病人的血清從結(jié)核分枝桿菌基因組表達(dá)文庫(kù)中鑒定出Mtbll(即CFP-10)、Mtb8、Mtb48和DPEP(富含脯氨酸的蛋白)，并得到各自的重組蛋白。通過(guò)血液細(xì)胞分析儀檢測(cè)，將 Mtbl1、Mtb8與38kDa蛋白的編碼基因重組構(gòu)建經(jīng)大腸埃希菌表達(dá)為多表位的蛋白聚合體TbF10，在此基礎(chǔ)上，又加入Mtb48構(gòu)建成蛋白聚合體TbF6，兩者用于診斷，比單一抗原法的靈敏度都有所提高，再加入DPEP則能顯著提高檢測(cè)的靈敏度。多抗原“雞尾酒”診斷方法有利于節(jié)約生產(chǎn)和檢測(cè)成本，如進(jìn)一步優(yōu)化抗原組合，可以在發(fā)展中國(guó)家推廣使用。

    2.循環(huán)免疫復(fù)合物(CIC)測(cè)定 特異性循環(huán)免疫復(fù)合物的檢測(cè)是結(jié)核病血清學(xué)診斷中的另一重要領(lǐng)域?；顒?dòng)性結(jié)核病人特異性IgG類免疫復(fù)合物明顯增加，并隨病情的好轉(zhuǎn)而下降，故檢測(cè)血清、腦脊液、胸腹水中的結(jié)核特異性免疫復(fù)合物對(duì)活動(dòng)性結(jié)核的診斷也有重要的意義。經(jīng)血液分析儀研究，部分活動(dòng)性肺結(jié)核病人痰菌檢查陽(yáng)性，而血清結(jié)核抗體測(cè)定為陰性，其原因之一就是形成CIC所致。因此，眾多的研究者認(rèn)為檢測(cè)結(jié)核病人CIC含量有助于結(jié)核病的輔助診斷。檢測(cè)CIC最簡(jiǎn)便的方法為酶標(biāo)法。CIC-ELISA特異性比痰涂片要高，尤其對(duì)不易得到痰標(biāo)本的兒童結(jié)核和肺外結(jié)核效果較好。

    3.免疫印跡技術(shù) 免疫印跡技術(shù)是高分辨的SDS-PAGE技術(shù)與高敏感性的酶聯(lián)反應(yīng)技術(shù)的結(jié)合產(chǎn)物。目前，該技術(shù)已被轉(zhuǎn)化成產(chǎn)品，操作者只要通過(guò)后半步驟的酶聯(lián)免疫反應(yīng)，即可檢出待檢標(biāo)本中所含的多種結(jié)核分枝桿菌多肽抗原成分的特異性抗體。北京生產(chǎn)的TB-40結(jié)核抗體免疫印跡法檢測(cè)試劑盒選取的抗原來(lái)自于結(jié)核分枝桿菌全菌，并篩選出最具免疫原性及特異性高的蛋白成份做為診斷抗原，大幅度提高了診斷準(zhǔn)確性，并可做為結(jié)核病診斷的確證實(shí)驗(yàn)。用于檢測(cè)痰菌陽(yáng)性結(jié)核患者、痰菌陰性結(jié)核患者、肺外結(jié)核病的敏感性分別為93%、86%、89%，特異性超過(guò)95%。

    4.酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)(ELISpot)技術(shù) ELISpot技術(shù)是檢測(cè)細(xì)胞分泌細(xì)胞因子的一種實(shí)驗(yàn)方法，采用可定量的夾心ELISA方法，通過(guò)ELISpot酶聯(lián)斑點(diǎn)分析系統(tǒng)對(duì)加底物后形成的斑點(diǎn)分析后得出結(jié)果。ELISpot具有較高的特異性和敏感性，目前正被國(guó)內(nèi)外廣泛應(yīng)用。英國(guó)Ewer等用ELISpot檢測(cè)對(duì)結(jié)核分枝桿菌分泌的抗原有特異性反應(yīng)的T淋巴細(xì)胞來(lái)診斷早期結(jié)核病。經(jīng)過(guò)血細(xì)胞分析儀研究，這項(xiàng)研究共納入了結(jié)核流行區(qū)有不同程度結(jié)核病接觸史的535名學(xué)生，結(jié)果顯示結(jié)核菌素皮膚試驗(yàn)(TST)和 ELISpot的一致性達(dá)89%(P<0.0001)。但ELISpot與研究對(duì)象結(jié)核病接觸程度之間的正相關(guān)性顯著強(qiáng)于TST。在接種過(guò)BCG的兒童中，TST假陽(yáng)性的可能性較大，而B(niǎo)CG接種對(duì)ELISpot結(jié)果沒(méi)有影響。作者認(rèn)為ELISpot可開(kāi)始替代TST，這將使更多的人能在感染仍處于隱匿期時(shí)就可進(jìn)行預(yù)防，而不至于發(fā)展成為嚴(yán)重的結(jié)核病。

    5.蛋白芯片技術(shù) 蛋白芯片技術(shù)借助于高通量蛋白檢測(cè)技術(shù)平臺(tái)，將結(jié)核分枝桿菌多種抗原固相于同一微孔濾膜并利用微孔濾膜的滲濾、濃縮、凝集作用，使抗原抗體反應(yīng)在固相膜上快速進(jìn)行，然后以免疫金作為標(biāo)記物直接在膜上顯色。再以蛋白芯片閱讀儀自動(dòng)掃描膜上顏色，建立多種結(jié)核抗原的蛋白芯片檢測(cè)系統(tǒng)。該檢測(cè)系統(tǒng)具有以下優(yōu)點(diǎn): 操作簡(jiǎn)便、快速，病人血清分離出來(lái)后，只需5分鐘就可以為臨床提供有價(jià)值的實(shí)驗(yàn)資料；敏感性高，特異性強(qiáng)，符合臨床輔助診斷要求；結(jié)果的判斷采用芯片識(shí)別閱讀儀，避免了人為判讀時(shí)的主觀誤差。

    6.體液中結(jié)核抗原或抗體的檢測(cè) 結(jié)核抗體檢測(cè)技術(shù)已日趨成熟，測(cè)定的標(biāo)本除血清外還有腦脊液、胸腹水、痰、灌洗液和尿液等。Singh等聯(lián)合檢測(cè)尿液和血清中抗體診斷結(jié)核病有很高的靈敏度，為進(jìn)一步研究檢測(cè)尿液中的抗體診斷結(jié)核病打下了基礎(chǔ)。由于機(jī)體受到結(jié)核分枝桿菌感染后，體內(nèi)首先出現(xiàn)的是結(jié)核抗原，而結(jié)核抗體則要感染后8周起逐漸產(chǎn)生，因此檢測(cè)結(jié)核抗原具有早期診斷價(jià)值。尤其對(duì)結(jié)核性腦膜炎的快速診斷、對(duì)器官移植術(shù)后并發(fā)結(jié)核感染的確定和對(duì)肺結(jié)核與肺癌的鑒別診斷等尤為重要。目前，有關(guān)結(jié)核抗原檢測(cè)的研究國(guó)內(nèi)外均有報(bào)道，其中尤以腦脊液結(jié)核抗原檢測(cè)的研究較多。Song等用抗結(jié)核分枝桿菌過(guò)氧化氫酶-過(guò)氧化物酶（mKatG）單克隆抗體，采用蛋白印跡技術(shù)來(lái)檢測(cè)病人組織中的mKatG抗原，其敏感性為55%，特異性為100%。痰標(biāo)本中的結(jié)核抗原檢測(cè)也有報(bào)道，但技術(shù)問(wèn)題較多，因?yàn)樘凳遣痪鶆虻恼衬z樣半流性液體，很難準(zhǔn)確測(cè)定。

    展望

    現(xiàn)有結(jié)核病的診斷方法并未能滿足臨床需要，未來(lái)結(jié)核病診斷試劑的發(fā)展更加強(qiáng)調(diào)簡(jiǎn)單、價(jià)廉、快速、敏感而且特異，且對(duì)特定的人群要有特定的檢測(cè)診斷方法。目前我們應(yīng)加強(qiáng)下述內(nèi)容的研究：①發(fā)現(xiàn)更多的特異性抗原聯(lián)合用于檢測(cè)：由于結(jié)核分枝桿菌抗原結(jié)構(gòu)復(fù)雜，分枝桿菌屬中各種細(xì)菌之間抗原性存在廣泛的交叉，因此應(yīng)結(jié)合分枝桿菌基因組學(xué)和比較基因組學(xué)的成果，著重于結(jié)核分枝桿菌特異性抗原的分析和純化；②加強(qiáng)血細(xì)胞分析儀測(cè)定方法的研究，進(jìn)一步提高檢測(cè)方法的敏感性和特異性：要對(duì)方法的最佳測(cè)定條件、可能的影響因素等進(jìn)行細(xì)致研究；要通過(guò)大量標(biāo)本的測(cè)定結(jié)果比較，選擇最佳測(cè)定方法，并使之在基層推廣應(yīng)用；要研究定量測(cè)定，盡可能用儀器判斷結(jié)果，以避免人為測(cè)定誤差；③加強(qiáng)對(duì)特定的人群如痰涂片陰性病人、合并HIV感染者、老年患者或隱性感染者、肺外結(jié)核病和兒童結(jié)核病等特定的檢測(cè)診斷方法的研究；④加強(qiáng)對(duì)除痰外的多種體液檢測(cè)的研究，如尿液，容易收集且無(wú)創(chuàng)，特異，是未來(lái)結(jié)核病血清學(xué)診斷的方向。

文章來(lái)源--普朗醫(yī)療器械公司網(wǎng)編發(fā)表，轉(zhuǎn)載請(qǐng)注明出處。