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通過血液分析儀準確計數(shù)血小板的基本方法介紹
通過血液分析儀準確計數(shù)血小板的基本方法介紹
加入時間:2011-12-15 09:18:13 當前新聞點擊率:4757
普朗醫(yī)療器械公司知識——由于近些年,如何利用血液分析儀對外周血的血小板進行準確計數(shù)已經(jīng)成為了業(yè)界的討論焦點和研究對象。專家也在不斷的探究新的方法和計數(shù)。然而就目前而言,最為主要和普遍的方法就是免疫學(xué)測定法和二維激光散射法。 1.免疫學(xué)測定法 本法早在1988年即由Aulter提出,但最近幾年才深入研究并見諸實用。Dickerhoff(1995)和Matzdorff(1998)應(yīng)用熒光標記抗血小板膜糖蛋白抗體,用FCM法計數(shù)血小板;Davis(1999),Gill(2000)和Harrison(2000)等進一步完善了這一方 法。所用的單抗,早期是抗CD41或CD42b,近來多用抗CD61,三種單抗效果相同。FCM方法都比較復(fù)雜,一般是先在流式血球儀上計數(shù)著染熒光的血 小板和計數(shù)紅細胞,先求出血小板/紅細胞之比值(下稱血小板比率),再用普通血液細胞分析儀計數(shù)同一患者的紅細胞數(shù)。然后以血小板比率×紅細胞數(shù)=血小板數(shù)。 Dickerhoff則改用已知其濃度的熒光微球代替紅細胞,先求出血小板/熒光微球之比值,再乘以熒光微球的濃度,即得到血小板數(shù)。上述方法都比較麻 煩,熒光微球價格高昂,難以在常規(guī)作中推廣使用。為此,Gill等改在Abbott公司的CELL-DYN4000型血液分析儀上,直接計數(shù)著熒光的血小 板,完全省去FCM法要先求血小板比率的步驟。由于用的是現(xiàn)成的儀器,而一般的血液分析儀,都已有一套成熟的操作、校準和質(zhì)控系統(tǒng),故計數(shù)結(jié)果比較準確, 可用于常規(guī)工作。 本法是最近幾年由Bayer公司研制的Advia 120型血液分析儀首先推出的。其設(shè)計原理是:根據(jù)同質(zhì)性球體光散射的Mie理論(Mie theory of light scatter for homogenenous spheres),當球形化的血小板一個一個地通過激光照射區(qū)時,在兩個角度進行測定:高角度(5°-15°)主要測細胞折射指數(shù)(refractive index,簡稱RI),它與細胞的密度有關(guān):低角度(2°-3°),主要是測細胞的大小。血小的體積在1-30fL,RI在1.35-1.40之間。由 于紅細胞含有高濃度的血紅蛋白,其折射指數(shù)高(Ri可達1.44),故大血小板雖然可能與小紅細胞、紅細胞碎片、紅細胞殘?。╣host)以及其它細胞碎 片的體積相似,但因為容物不同,RI相差較大,因二維散圖上可區(qū)別并分別計數(shù)。此法無需熒光標記的抗體。也沒有繁瑣的預(yù)處理步驟,可以隨常規(guī)工作與其它血 細胞計數(shù)同進進行,使用十分方便。我們已應(yīng)用于實際工作中,效果甚好。 文章來源--普朗醫(yī)療器械公司網(wǎng)編發(fā)表,轉(zhuǎn)載請注明出處。 |