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   普朗醫(yī)療器械公司資訊 近年來，如何利用血液細(xì)胞分析儀準(zhǔn)確計數(shù)外周血中的血小板，已成為血液學(xué)和檢驗醫(yī)學(xué)界的熱門話題。

    為什么精確計數(shù)血小板如此的重要呢？其原因有二：一是臨床上需要輸血小板者日益增多，僅在美國，每年輸血小板 就達(dá)700多萬單位以上。由于輸注血小板價格高昂，且易發(fā)生免疫性輸血反應(yīng)和存在感染的風(fēng)險，故英、美等國，近年來紛紛提出降低輸血小板的起點(diǎn) （triggerpoint）或門（threshold），由過去的20×109 /L降至10×109 /L，甚至5×109 /L，因此迫切要求準(zhǔn)確計數(shù)血小板。二是迄今為止，所有計數(shù)血小板的方法，對于血小板減少的標(biāo)本，其準(zhǔn)確性都比較差，亟需研究改進(jìn)。

    準(zhǔn)確計數(shù)血小板實(shí)非易事。血小板體積小、無色、易粘附。通過血細(xì)胞分析儀檢測，當(dāng)血液自血管破損處流出時，血小板一經(jīng)與破損的血管內(nèi)皮細(xì)胞及組織成分接觸，立即以極快的速度粘附 于破損的血管壁。因此，無論用何種方法采血，所數(shù)得血小板數(shù)，均較血中實(shí)際血小板數(shù)為低，皮膚穿刺采血比靜脈穿刺更低。此外，血小板易發(fā)生聚集，通常我們 在血涂片或骨髓涂片上所見到的血小板，很多是幾個聚集在一起的，制片耽擱時間越長，聚集越多。更重要的是，目前所有的血小板計數(shù)方法，都存在不少缺陷。

    世界衛(wèi)生組織（WHO）推薦的血小計數(shù)方法，有人稱它為國際參考方（下稱參考方），是用Ig/dl的草酸銨溶液作溶血-稀釋劑，在相差顯微鏡下，用血細(xì)胞 計數(shù)板肉眼計數(shù)。和一切手工計數(shù)法一樣，該法除了細(xì)胞在計數(shù)板上散布的天然誤差之外，最大的缺點(diǎn)是計數(shù)的血小板太少。例如，一個重度血小板減少的患者，如 果血小板計數(shù)為10×109 /L，實(shí)際上在鏡下只數(shù)到10個血小板，復(fù)性很差。據(jù)Harrison稱，這一方法在不同的操作者之間的變異系統(tǒng)（CV）可達(dá)10%-25%。自動化的血液分析儀，無論是阻抗法還是光散射法，對于血小板數(shù)及形態(tài)正常的標(biāo)本，結(jié)果一般比較可靠，但對于血小板明顯減少和/或形態(tài)異常者，所得結(jié)果誤差甚大，有時 甚至難以計數(shù)。其原因是：這些方法基本上都是依據(jù)細(xì)胞的近似血小板的所謂“非血小板顆粒”（nonplatelet particles,簡稱NPPs），如小紅細(xì)胞、紅細(xì)胞碎片、白細(xì)胞碎片、細(xì)菌和真菌以及免疫復(fù)合物等，會被當(dāng)作血小板加以計數(shù)，從而使血小板數(shù)假性增 多。Hammerstrom在一例急性髓細(xì)胞白血?。∕5型）合并DIC患者的外周血片中，發(fā)現(xiàn)大量大小近似血小板的小體。經(jīng)用細(xì)胞化學(xué)染色、免疫組化染 色等多種方法鑒別，發(fā)現(xiàn)其中約1/3與白細(xì)胞反應(yīng)相同；繼用抗血小板抗體作免疫組化染色，僅4%呈陽性。證明這種物體，大多數(shù)是白細(xì)胞或紅細(xì)胞碎片而非血 小板。另一方面，正常人血小板體積相差甚大，可自2fL至 20fL以上。其體積分布直方圖不是對稱的，而是明顯地向右延伸，即都存在一定數(shù)量的大血小板。在病理情況下，如原發(fā)性血小板減少性紫癜、急性心肌梗塞、 糖尿病等，大血小板會增多。由于大部分血液分析儀不能將大血小板與小紅細(xì)胞等分開（只能提示可能有大血小板存在），致使許多大血小板被當(dāng)作紅細(xì)胞而未計入 血小板總數(shù)中，從而使血小板計數(shù)結(jié)果偏低。

    由此可見，要想在日常用的血液分析儀上，用一般方法，達(dá)到準(zhǔn)確計數(shù)血小板是不可能的，必須另辟蹊徑。

    目前已報道的準(zhǔn)確計數(shù)血小板的方法，大體上有兩大類。一是免疫學(xué)方法，即用熒光標(biāo)記的抗血小板抗體，特異地著染血小板，在流式細(xì)胞儀（FMC）或特定的血液細(xì)胞分析儀上計數(shù)血小板。二是用二維激光散射（two-dimensinal laser light scatter）測定法，將血小板與NPPs分開，達(dá)到準(zhǔn)確計數(shù)。

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