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關(guān)于尿液分析儀試條的化學(xué)反應(yīng)機理的正確說明
關(guān)于尿液分析儀試條的化學(xué)反應(yīng)機理的正確說明
加入時間:2012-08-09 09:32:09 當(dāng)前新聞點擊率:3464
關(guān)于尿液分析儀試條的化學(xué)反應(yīng)機理的正確說明,具體內(nèi)容如下:
尿液分析儀的試條法是通過化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生的顏色變化進(jìn)行測定的。早期是用肉眼觀察顏色變化及深淺,并與一標(biāo)準(zhǔn)色板進(jìn)行比較而作定性或半定量。這種方法目前在一些標(biāo)本量少的單位和供個人使用的試條仍大量使用,但在大批量檢查時顯得效率太低,而且肉眼比色受主觀因素的影響,精密度較差,人眼對顏色深度的微細(xì)差別往往不及醫(yī)療器械,因此靈敏度也較差。
當(dāng)前應(yīng)用最廣的是半自動尿液分析儀,該儀器實質(zhì)上是一臺反射式光度計,經(jīng)過改進(jìn),精密度及靈敏度不斷提高,已成為當(dāng)前國內(nèi)外臨床檢驗最常用的儀器之一。新式的儀器往往采用多個波長。有的用了壽命較長的發(fā)光二極管作為光源,有的多達(dá)十多個檢測器,并配有功能齊全的電腦。最先進(jìn)的全自動尿液分析儀和血紅蛋白儀、全自動血液分析儀一樣,自動化程度很高,測定時,將貼了條形碼的尿樣管排列于轉(zhuǎn)盤上,啟動儀器,轉(zhuǎn)動著的試條筒使試條轉(zhuǎn)至光路區(qū),儀器即自動按順序吸尿樣加至每個試塊,自動進(jìn)行測定,熒屏顯示結(jié)果及打印,全部按程序自動進(jìn)行, 無需人看管。該儀器還有一特制白色濾紙墊塊,用于檢測尿的顏色(最新的儀器已經(jīng)能測定尿的濁度)。同時有校正儀器用的專用試條,測定中(配合質(zhì)控液)可插入對儀器進(jìn)行質(zhì)控的試條。這種儀器除了效率高、測定項目多、污染少以外,最大的優(yōu)點是加尿量及讀取結(jié)果的時間一致而半自動尿液分析儀的試條靠手工浸尿液后再置入儀器中,易造成污染,且條件難以一致,往往影響結(jié)果。所以這種儀器的精密度和準(zhǔn)確性都有大大提高。
關(guān)于尿液分析儀試條的化學(xué)反應(yīng)機理,像葡萄糖、蛋白、亞硝酸鹽、酮體、白細(xì)胞酯酶、尿膽原和膽紅素等,在一般教科書上都有介紹,在此只著重講關(guān)于過氧化物酶作用的原理。其所以要特別強調(diào)這個酶,除了因為它在臨床免疫、臨床血液學(xué)、臨床生化以及體液檢驗中廣泛應(yīng)用之外,更重要的是在國內(nèi)發(fā)表的不少檢驗醫(yī)學(xué)的文章(甚至少數(shù)教科書)中,對尿液分析儀的這一反應(yīng)的原理作了錯誤的論述,必須予以澄清。有些文章說:“過氧化物酶催化過氧化氫放出的新生氧,氧化了聯(lián)苯胺等而顯色”是不準(zhǔn)確的??赡苁怯械耐痉植磺暹^氧化氫酶和過氧化酶。過氧化氫酶(觸酶)能催化過氧化氫放出新生氧,而過氧化物酶只是在有供氫(電子)體的情況下,催化供氫體脫氫(氧化),同時使過氧化還原為水,試看以下反應(yīng):
觸酶
過氧化氫酶:H 2 O 2 -H 2 2H 2 O-O 2
上式表明,過氧化氫酶實際上是使一分子 H 2 O 2 脫氫(氧化),而另一分子 H 2 O 2 加氫(還原)成水,同時放出氧(新生氧)。
AH 2 -H 2 O 2
A-2H 2 O . 過氧化酶(無色) (有色)
上式中的 AH 2 是一種供氫(電子)體,通常是一類苯胺或酚,如聯(lián)苯胺、 4- 氯 -1- 萘酚等。其本身不含發(fā)色基團(tuán),故無色。當(dāng)其脫氫后,分子結(jié)構(gòu)發(fā)生了變化,出現(xiàn)了色基(例如醌式結(jié)構(gòu):或) 從而顯色。事實上在此反應(yīng)中,如僅有過氧化氫而無供氫體,反應(yīng)就不能進(jìn)行:并且反應(yīng)的結(jié)果是生成氧化了的供氫體和水,不產(chǎn)生“新生氧”。這在一些生化和免疫組織化學(xué)教科書上都已有說明,可有些檢驗的文章至今仍在重復(fù)錯誤的說法。
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