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        1.淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)(lymphocyte blastogenesis test)： T細(xì)胞在體外受特異性抗原(舊結(jié)核菌素等)或有絲分裂原(pHA、ConA等)刺激后，能轉(zhuǎn)化為淋巴母細(xì)胞。試驗(yàn)時(shí)取外周血或分離的淋巴細(xì)胞，加入有絲分裂原或特異性抗原，在培養(yǎng)液中培養(yǎng)72小時(shí)，經(jīng)涂片染色后鏡檢計(jì)算轉(zhuǎn)化百分率，并借助酶標(biāo)儀于波長(zhǎng)570nm下測(cè)吸光值作為判斷指標(biāo)。正常人為70％左右，轉(zhuǎn)化率低表明細(xì)胞免疫功能下降。若在培養(yǎng)終止前6小時(shí)加入3H-TdR，經(jīng)β液體閃爍儀檢測(cè)淋巴細(xì)胞內(nèi)3H-TdR的摻入量，亦可算出轉(zhuǎn)化率。由于活的增殖細(xì)胞具有吸收四甲基偶氮唑鹽(MTT)的能力，活化的線粒體能裂解四氮唑環(huán)而產(chǎn)生顏色反應(yīng)，MTT法簡(jiǎn)單易行，常被一般實(shí)驗(yàn)室采用。該試驗(yàn)可檢測(cè)細(xì)胞的增殖和細(xì)胞毒活性。

　　2.淋巴細(xì)胞參與的細(xì)胞毒性試驗(yàn)(lymphocyte mediated cytotoxicity test，LMC-T) 系檢測(cè)CTL的方法。當(dāng)CTL再次接觸靶抗原時(shí)，在酶標(biāo)儀的檢測(cè)下，即表現(xiàn)出破壞、溶解靶細(xì)胞的特性。這種特性稱為L(zhǎng)MC，檢測(cè)時(shí)將受試者外周血單個(gè)核細(xì)胞(效應(yīng)細(xì)胞)與傳代的51Cr標(biāo)記的腫瘤細(xì)胞(靶細(xì)胞)按一定的效靶比例混合，于37℃孵育一定時(shí)間，離心后用γ計(jì)數(shù)器測(cè)定上清同位素強(qiáng)度，其強(qiáng)度與效應(yīng)細(xì)胞的細(xì)胞毒性成正比。按下式計(jì)算溶解百分率作為判斷指標(biāo)?？赏ㄟ^(guò)測(cè)定腫瘤患者CTL對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷力，判斷患者的預(yù)后和觀察其療效。

　　溶解百分率＝(實(shí)驗(yàn)組cpm-自發(fā)釋放組cpm)×100％/(最大釋放組cpm-自發(fā)釋放組cpm)

　　3.T細(xì)胞功能的體內(nèi)測(cè)定法：在臨床上常用的方法是體內(nèi)皮試法，細(xì)胞免疫功能正常者可出現(xiàn)硬結(jié)、紅斑等陽(yáng)性反應(yīng)，細(xì)胞免疫功能低下者常呈弱陽(yáng)性或陰性反應(yīng)。臨床上常作為某些病原微生物感染的診斷和觀察腫瘤患者的細(xì)胞免疫狀態(tài)、療效、及其預(yù)后的指標(biāo)。①生物性抗原皮膚試驗(yàn)：分為特異性與非特異性兩類，前者包括以結(jié)核菌素(OT)、純蛋白衍生物(PPD)及鏈激酶-鏈道酶(SK-SD)等為抗原的皮膚試驗(yàn)，可以利用酶標(biāo)儀檢測(cè)觀察。其中以舊結(jié)核菌素皮膚試驗(yàn)應(yīng)用最為普遍。定量注射上述抗原于前臂屈側(cè)皮內(nèi)，24～48小時(shí)觀察結(jié)果，局部出現(xiàn)紅腫，硬結(jié)者(＞0.5cm)為陽(yáng)性。后者多用有絲分裂原如植物血凝素(PHA)作皮膚試驗(yàn)，一般在注射后6～12小時(shí)局部出現(xiàn)紅斑、硬結(jié)，24～48小時(shí)可達(dá)高峰，硬結(jié)大于1.5cm為陽(yáng)性。在特異性抗原皮試中，若受試者從未接觸過(guò)所試抗原，則多不出現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng)，因而往往作兩種以上抗原皮試，以對(duì)受試者的細(xì)胞免疫功能作出綜合評(píng)價(jià)。②化學(xué)性半抗原皮試：此類半抗原常用二硝基氯苯(DNCB)和二硝基氟苯(DNFB)，皆系小分子物質(zhì)，進(jìn)入皮膚后即與組織蛋白結(jié)合，構(gòu)成完全抗原并引起遲發(fā)型超敏反應(yīng)。試驗(yàn)時(shí)先將受試者致敏，即將1％DNCB或DNFB丙酮溶液涂于前臂皮膚，24小時(shí)后洗去并于2~3周后再以小劑量DNCB或DNFB涂于同側(cè)或?qū)?cè)皮膚，以24~48小時(shí)后發(fā)生紅腫、硬結(jié)醫(yī)學(xué)教|育網(wǎng)|收集整理、水泡或潰瘍?yōu)殛?yáng)性。細(xì)胞免疫功能低下或缺陷者，常呈弱陽(yáng)性或陰性反應(yīng)。但由于局部反應(yīng)較大，病人難以接受。

        研究表明，在酶標(biāo)儀的輔助下，可以更加有效的觀察、檢測(cè)淋巴T細(xì)胞的功能和相關(guān)的反應(yīng)機(jī)制。

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