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血凝分析儀的生物化學(xué)法的三種形式
加入時(shí)間:2012-07-17 09:35:04  當(dāng)前新聞點(diǎn)擊率:4895
大家都知道血凝分析儀也就是血凝儀,血凝分析儀的生物化學(xué)法是通過測(cè)定產(chǎn)色底物的吸光度變化來推測(cè)所測(cè)物質(zhì)的含量和活性的,該方法又可稱為底物顯色法。
血凝分析儀使用產(chǎn)色底物檢測(cè)血栓與止血指標(biāo)的原理是:通過人工合成與天然凝血因子有相似的一段氨基酸排列順序并還有特定作用位點(diǎn)的小肽,并將可水解產(chǎn)色的化學(xué)基因與作用位點(diǎn)的氨基酸相連。測(cè)定時(shí)由于凝血因子具有蛋白不解酶的活性,它不僅作用于天然蛋白質(zhì)肽鏈,也能作用于人工合成的肽段底物,從而釋放出產(chǎn)色基因,使溶液呈色。產(chǎn)生顏色的深淺與凝血因子活性成比例關(guān)系,故可進(jìn)行精確的定量。目前人工合成的多肽底物有幾十種,而最常用的是對(duì)硝基苯胺(PNA),呈黃色,可用405mm波長(zhǎng)進(jìn)行測(cè)定。
普朗醫(yī)療器械專家指出血凝分析儀生物化學(xué)法通常使用以下三種形式:
第一、先將被檢血漿中的某種酶加以激活,然后由此活化的凝血因子對(duì)人工合成的底物進(jìn)行水解而呈色,如纖溶酶原,蛋白C測(cè)定等。
第二、向被檢血漿中加入過量的有關(guān)試劑,以中和相應(yīng)的抗凝因子,然后測(cè)定其殘余的酶活性,如AT-活性測(cè)定,α2-抗纖溶酶測(cè)定,肝素測(cè)定等。
以測(cè)定抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)為例,在反應(yīng)體系中加入過量的凝血酶,后者與血漿中的AT-Ⅲ形成1:1復(fù)合物,剩余凝血酶作用于合成的凝血酶底物S-2238(H-D-Phe-Pip-Arg-PNA·2Hcl),釋放出顯色基團(tuán)PNA,顯色反應(yīng)的深淺與剩余凝血酶的量呈正相關(guān),而與AT-Ⅲ的活性呈負(fù)相關(guān)。
第三、直接測(cè)定被檢血漿中某種蛋白水解酶的活性,如凝血酶,Xa,尿激酶測(cè)定等。
血凝分析儀生物化學(xué)法靈敏度高、精密度好,而且易于自動(dòng)化,為血栓/止血檢測(cè)開辟了新途徑。
 
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