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全自動(dòng)生化分析儀基本測(cè)定方法
全自動(dòng)生化分析儀基本測(cè)定方法
加入時(shí)間：2013-10-08 15:27:50 當(dāng)前新聞點(diǎn)擊率：2286
全自動(dòng)生化分析儀的應(yīng)用決不僅僅是操作方法的變化，由于引進(jìn)了一系列高精技術(shù)，所用的方法測(cè)定原理都有了迅速的發(fā)展。因此，用好全自動(dòng)分析儀的一個(gè)重要前提，必須對(duì)自動(dòng)分析儀可以提供的測(cè)試方法類(lèi)型、儀器室條件及儀器操作有所了解。下面，普朗醫(yī)療器械網(wǎng)小編就給大家簡(jiǎn)單介紹一下全自動(dòng)生化分析儀基本測(cè)定方法：
1.終點(diǎn)法
根據(jù)反應(yīng)達(dá)到平衡時(shí)反應(yīng)產(chǎn)物的吸收光譜特征及其吸光度大小，對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定量分析的方法。在測(cè)定計(jì)算方式上，一般分為一點(diǎn)法和兩點(diǎn)法兩種。
（1）一點(diǎn)法
以試劑和樣品混合之前的空氣空白(GB)、水空白(WB)或試劑空白(RB)的吸光度值為測(cè)定計(jì)算基點(diǎn)，以反應(yīng)終點(diǎn)的吸光度讀數(shù)減去空白讀數(shù)，得到反應(yīng)吸光度。通過(guò)與相同條件下校準(zhǔn)液反應(yīng)吸光度的比較，求得測(cè)定結(jié)果。常與一點(diǎn)校準(zhǔn)法配合使用，即采用一個(gè)校準(zhǔn)濃度，校準(zhǔn)曲線通過(guò)零點(diǎn)且成線性。也應(yīng)用多點(diǎn)校準(zhǔn)。
（2）兩點(diǎn)終點(diǎn)法
也稱(chēng)固定時(shí)間法。在單試劑分析中，該法可以消除樣品以及試劑的顏色、濁度的干擾，其原理是在樣品與試劑混合后的延滯期后讀取一個(gè)點(diǎn)A1，一定時(shí)間后讀取A2，ΔA=A2-A1，然后比較標(biāo)準(zhǔn)和測(cè)定的ΔA值，求得待測(cè)物的濃度。單試劑分析常見(jiàn)的有肌酐苦味酸法。在雙試劑分析中，該法還具有消除內(nèi)源性物質(zhì)測(cè)定的干擾，其原理是加入試劑1后讀取A1，加入試劑2后讀取A2，A1相當(dāng)于讀出樣品空白值，A2才是實(shí)際呈色反應(yīng)，因此ΔA=A2-A1。
2. 連續(xù)監(jiān)測(cè)法
其原理是在酶促反應(yīng)的最適條件下，用物理、化學(xué)或酶促反應(yīng)的分析方法，在反應(yīng)速度恒定期（零級(jí)反應(yīng)期）來(lái)連續(xù)觀察和記錄一定反應(yīng)時(shí)間內(nèi)底物或產(chǎn)物量的變化，以單位時(shí)間酶反應(yīng)初速度計(jì)算出酶活力的大小和代謝物的濃度。其具體方法有兩點(diǎn)速率法和多點(diǎn)速率法。
（1）兩點(diǎn)速率法
觀察在零級(jí)反應(yīng)期內(nèi)兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)的吸光度，用兩個(gè)點(diǎn)的吸光度的差值（ΔA）除以時(shí)間（分），計(jì)算出每分鐘的吸光度變化值。
（2）多點(diǎn)速率法
在酶促反應(yīng)進(jìn)程的零級(jí)反應(yīng)期內(nèi)每隔一定時(shí)間（2-30s)進(jìn)行一次監(jiān)測(cè)，連續(xù)監(jiān)測(cè)多次，求出單位時(shí)間內(nèi)的反應(yīng)速度。
3. 比濁測(cè)定法
全自動(dòng)生化分析儀一般只能做透射比濁分析，其原理是在光源的光路方向測(cè)量透過(guò)光強(qiáng)度，它常用于終點(diǎn)法測(cè)定，目前應(yīng)用較多的為免疫透射比濁法。目前主要用于血清特種蛋白的檢測(cè)，如載脂蛋白、微量蛋白、急性時(shí)相反應(yīng)蛋白、免疫球蛋白以及某些藥物監(jiān)測(cè)等。 |
